Ola íon Saposhnikovia divaricata le haghaidh coinneal agus gallúnach a dhéanann diffuser mórdhíola ola riachtanach nua le haghaidh idirleata dóire giolcach
cur síos gairid:
2.1. SDE a ullmhú
Ceannaíodh riosóim SD mar luibh triomaithe ó Hanherb Co. (Guri, an Chóiré). Dheimhnigh an Dr Go-Ya Choi ó Institiúid Leigheas Oirthearach na Cóiré (KIOM) na hábhair phlandaí go tacsanomaíoch. Cuireadh eiseamal dearbhán (uimhir 2014 SDE-6) i dtaisce i Luibhelann na gCóiré d'Acmhainní Luibhe Caighdeánacha. Baineadh riosóim triomaithe de SD (320 g) faoi dhó le eatánól 70% (le aife 2 h) agus díríodh an sliocht ansin faoi bhrú laghdaithe. Rinneadh an decoction a scagadh, a lyophilized, agus a stóráil ag 4 ° C. Ba é 48.13% (w/w) toradh eastóscáin triomaithe ó amhábhair thosaigh.
2.2. Anailís Chainníochtúil ar Chrómatagrafaíocht Leachtach Ardfheidhmíochta (HPLC).
Rinneadh anailís chromatagrafach le córas HPLC (Waters Co., Baile na nGallóglach, MA, SAM) agus brathadóir eagair fóta-óid. Maidir le hanailís HPLC ar SDE, an prim-O-cheannaíodh caighdeán glucosylcimifugin ó Institiúid um Chur Chun Cinn na Cóiré do Thionscal an Leighis Traidisiúnta (Gyeongsan, an Chóiré), agussoic-O-glucosylhamaudol agus 4′-O-β-D-glúcosil-5-O-Meitilvisamminol a aonrú laistigh dár saotharlann agus a shainaithint trí anailísí speictreach, go príomha ag NMR agus MS.
Díscaoileadh samplaí SDE (0.1 mg) in eatánól 70% (10 mL). Rinneadh scaradh crómatagrafach le colún XSelect HSS T3 C18 (4.6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Baile na nGallóglach, MA, USA). Is éard a bhí sa chéim shoghluaiste ná aicéataitrile (A) agus aigéad aicéiteach 0.1% in uisce (B) ag ráta sreafa 1.0 mL/nóim. Baineadh úsáid as clár grádán ilchéime mar seo a leanas: 5% A (0 nóim), 5–20% A (0–10 nóim), 20% A (10–23 nóim), agus 20–65% A (23–40 nóim) ). Scanadh an tonnfhad braite ag 210–400 nm agus taifeadadh é ag 254 nm. Ba é an toirt insteallta ná 10.0μL. Ullmhaíodh réitigh chaighdeánacha chun trí chromón a chinneadh ag tiúchan deiridh de 7.781 mg / mL (prim-O- glúcosylcimifugin), 31.125 mg/mL (4′-O-β-D-glúcosil-5-O-meitilvisamminol), agus 31.125 mg / mL (soic-O-glucosylhamaudol) i meatánól agus coinnithe ag 4°C.
2.3. Meastóireacht ar Ghníomhaíocht Frith-AlastaIn Vitro
2.3.1. Cultúr Cille agus Cóireáil Shamplach
Fuarthas cealla RAW 264.7 ón mBailiúchán Cultúir Cineál Meiriceánach (ATCC, Manassas, VA, SAM) agus fásadh iad i meán DMEM ina raibh 1% antaibheathaigh agus 5.5% FBS. Goradh cealla in atmaisféar tais de 5% CO2 ag 37°C. Chun na cealla a spreagadh, cuireadh meán DMEM úr in ionad an mheán, agus lipopolysaccharide (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, SAM) ag 1μg/mL i láthair nó in easnamh SDE (200 nó 400μg/mL) ar feadh 24 h breise.
Cuireadh cóireáil ar chealla le SDE agus spreagtar iad le LPS ar feadh 24 h. Rinneadh anailís ar tháirgeadh NÍL trí nítrít a thomhas ag baint úsáide as an imoibrí Griess de réir staidéir roimhe seo [12]. Rún na cítocíní athlastacha PGE2, TNF-α, agus socraíodh IL-6 ag baint úsáide as trealamh ELISA (córais T&F) de réir threoracha an déantóra. Cinneadh éifeachtaí SDE ar tháirgeadh NÍL agus cytokine ag 540 nm nó 450 nm ag baint úsáide as Wallac EnVision™léitheoir micreaphláta (PerkinElmer).
2.4. Measúnú ar Ghníomhaíocht Frith-airtríteasI Vivo
2.4.1. Ainmhithe
Ceannaíodh francaigh fireann Sprague-Dawley (7 seachtaine d’aois) ó Samtako Inc. (Osan, An Chóiré) agus cuireadh faoi dhálaí rialaithe iad le timthriall éadrom/dorcha 12-h ag°C agus% taise. Cuireadh aiste bia saotharlainne agus uisce ar fáil do francaighad libitum. Rinneadh na nósanna imeachta turgnamhacha go léir de réir threoirlínte na nInstitiúidí Náisiúnta Sláinte (NIH) agus d'fhormheas Coiste um Chúram agus Úsáid Ainmhithe ollscoil Daejeon (Daejeon, poblacht na Cóiré).
2.4.2. Ionduchtú OA le MIA i bhFrancaigh
Rinneadh na hainmhithe a randamach agus a shannadh do ghrúpaí cóireála sular cuireadh tús leis an staidéar (in aghaidh an ghrúpa). Tuaslagán MIA (3 mg/50μL de 0.9% saline) a instealladh go díreach isteach sa spás laistigh den articular na glúine ceart faoi ainéistéise a tharlódh le meascán de ketamine agus xylazine. Roinneadh francaigh go randamach i gceithre ghrúpa: (1) an grúpa saline gan aon instealladh MIA, (2) an grúpa MIA le instealladh MIA, (3) an grúpa cóireáilte SDE (200 mg / kg) le instealladh MIA, agus (4) ) an grúpa cóireáilte indomethacin- (IM-) (2 mg/kg) le hinstealladh MIA. Riaradh francaigh ó bhéal le SDE agus IM 1 seachtain roimh instealladh MIA ar feadh 4 seachtaine. Bhí an dáileog SDE agus IM a úsáideadh sa staidéar seo bunaithe orthu siúd a bhí fostaithe i staidéir roimhe seo [10,13,14].
2.4.3. Tomhais Dáileadh Meáchan-Iompar Hindpaw
Tar éis ionduchtú OA, cuireadh isteach ar an gcothromaíocht bhunaidh i gcumas meáchain iompair na lapaí droma. Baineadh úsáid as tástálaí éagumais (ionstraimíocht Linton, Norfolk, RA) chun athruithe ar an lamháltas meáchain a mheas. Cuireadh francaigh go cúramach sa seomra tomhais. Ba é meán an fórsa meáchain iompair a d'fheidhmigh an ghéag deiridh thar thréimhse 3 s. Ríomhadh an cóimheas dáilte meáchain leis an gcothromóid seo a leanas: [meáchan ar an ngéag dheiridh ar dheis/(meáchan ar an ngéag dheiridh + meáchan ar an ngéag ar chlé)] × 100 [15].
2.4.4. Tomhais ar Leibhéil Cíteacain Séiream
Rinneadh na samplaí fola a lártheifneoiriú ag 1,500 g ar feadh 10 nóiméad ag 4°C; ansin bailíodh an serum agus a stóráil ag -70 ° C go dtí úsáid. Na leibhéil IL-1β, IL-6, TNF-α, agus PGE2 sa séiream ag baint úsáide as feisteáin ELISA ó R&D Systems (Minneapolis, MN, SAM) de réir threoracha an déantóra.
2.4.5. Anailís Chainníochtúil RT-PCR Fíor-Ama
Baineadh RNA iomlán as fíochán comhpháirteach glúine ag baint úsáide as an imoibrí TRI® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, SAM), droim ar ais tras-scríofa go cDNA agus PCR-amplified ag baint úsáide as trealamh TM One Step RT PCR PCR le SYBR glas (Bithchórais Fheidhmeach , Grand Island, NY, USA). Rinneadh PCR cainníochtúil fíor-ama ag baint úsáide as an gcóras PCR Fíor-Ama 7500 Applied Biosystems (Applied Biosystems, Grand Island, NY, USA). Taispeántar na seichimh primer agus an seicheamh taiscéalaithe sa Tábla1. Méadaíodh comhlua de cDNAanna samplacha agus méid comhionann de GAPDH cDNA leis an máistir-mheascán TaqMan® Universal PCR ina raibh DNA polymerase de réir threoracha an déantóra (Applied Biosystems, Foster, CA, USA). Ba iad na coinníollacha PCR ná 2 nóiméad ag 50 ° C, 10 nóiméad ag 94 ° C, 15 s ag 95 ° C, agus 1 nóiméad ag 60 ° C ar feadh 40 timthriall. Cinneadh tiúchan na spriocghéine ag baint úsáide as an modh comparáideach Ct (uimhir timthriall tairsí ag trasphointe idir plota aimpliúcháin agus tairseach), de réir threoracha an mhonaróra.
Praghas FOB:US$0.5 - 9,999 / Píosa
Cainníocht Íosta:100 Píosa/Píosa
Cumas Soláthair:10000 Píosa/Píosa in aghaidh na Míosa
Osteoarthritis (OA) an neamhord mhatánchnámharlaigh is minice agus an galar degenerative comhpháirteach is coitianta i daoine scothaosta [1]. Is coinníoll é OA a tharlaíonn go páirteach de bharr gortú, caillteanas struchtúr agus feidhm cartilage, agus dírialú bealaí pro-athlastacha agus frith-athlastacha.2,3]. Cuireann sé isteach go príomha ar an cartilage articular agus cnámh fochondral na hailt synovial agus eascraíonn i cliseadh comhpháirteacha a dhéanamh, as a dtagann pian ar meáchan a fháil lena n-áirítear siúl agus seasamh [4].
Níl aon leigheas ann do OA, mar tá sé an-deacair an cartilage a athbhunú nuair a scriostar é [5]. Is iad na spriocanna cóireála pian a mhaolú, soghluaisteacht chomhpháirteach a chothabháil nó a fheabhsú, neart na n-alt a mhéadú, agus éifeachtaí díchumasaithe an ghalair a íoslaghdú. Tá sé mar aidhm ag cóireálacha cógaseolaíochta OA pian a laghdú chun comhfheidhm agus cáilíocht beatha an othair a mhéadú. Cé gurb é scrios cartilage an príomh-imeacht in OA, is é díghrádú collagen an t-eachtra bunúsach a chinneann dul chun cinn do-aisiompaithe OA i gcomhar le athlasadh [6,7]. Táthar ag súil go ndéanfaidh cóireálacha le gníomhaíocht frith-athlastach agus chondroprotective pian a mhaolú agus sláine maitrís a chothabháil in othair OA.
Mar sin, is dócha go mbeidh sé tairbheach i mbainistíocht OA laghdú athlasadh. Tugann staidéir le déanaí le fios róil chosanta d'acmhainní luibhe ar dhul chun cinn OA, i dtéarmaí athlasadh chondrocyte a mhaolú agus tuilleadh scrios cartilage, trína gcumas idirghníomhú le fíocháin chomhpháirteacha, rud a fhágann go ndéantar pian comhpháirteach a mhaolú [8].
An fhréamh deSaposhnikova divaricataBaineadh úsáid go forleathan as Schischkin (Umbelliferae) sa leigheas traidisiúnta chun tinneas cinn, pian, athlasadh agus airtríteas a chóireáil sa Chóiré agus sa tSín [9,10]. Éifeachtaí cógaseolaíochta éagsúla deSaposhnikova divaricata(SD) san áireamh freisin airíonna frith-athlastacha, analgesic, antipyretic, agus antiarthritic [9,11]. Léirigh staidéar le déanaí go bhfuil éifeachtaí féideartha airtríteas antirheumatoid ag sliocht cromáin SD i múnla luch de airtríteas collagen-spreagtha [10]; áfach, is beag staidéar a rinneadh chun tacú le gníomhaíocht frith-athlastach agus antiarthritis naSaposhnikova divaricatasliocht (SDE).
Dá bhrí sin, rinne an staidéar reatha imscrúdú ar ghníomhaíochtaí frith-athlastacha agus antiosteoarthritis sliocht eatánóil 70% de SD. Ar dtús, rinneadh meastóireacht ar éifeacht frith-athlastach SDEin vitroi gcealla RAW 264.7 spreagtha ag LPS. Ansin, rinneadh éifeacht antai-osteoarthritis SDE a thomhas trí mheasúnú a dhéanamh ar dháileadh meáchain, díghrádú cartilage articular, agus ar fhreagraí athlastacha i múnla francach de iodoacetate monosodium- (MIA-) OA tharlú.