Ola íon Saposhnikovia divaricata le haghaidh déanamh coinnle agus gallúnaí, ola riachtanach scaiptheoir mórdhíola nua le haghaidh scaiptheoirí dóire giolcach
cur síos gairid:
2.1. Ullmhú SDE
Ceannaíodh riosóim SD mar luibh thriomú ó Hanherb Co. (Guri, an Chóiré). Dheimhnigh an Dr. Go-Ya Choi de chuid Institiúid Leigheas Oirthearach na Cóiré (KIOM) na hábhair phlandaí go tacsanomaíoch. Taisceadh eiseamal dearbháin (uimhir 2014 SDE-6) i Luibhlann Acmhainní Luibhe Caighdeánacha na Cóiré. Baineadh riosóim thriomú SD (320 g) faoi dhó le 70% eatánól (le haife 2 uair an chloig) agus ansin comhchruinníodh an sliocht faoi bhrú laghdaithe. Scagadh an decoction, rinneadh é a lioifileáil, agus stóráladh é ag 4°C. Ba é 48.13% (m/m) toradh an sliocht thriomú ó ábhair thosaithe amha.
Rinneadh anailís chromatagrafach le córas HPLC (Waters Co., Milford, MA, SAM) agus brathadóir eagar fótadhóide. Chun an anailís HPLC ar SDE a dhéanamh, ba é an príomh-OCeannaíodh caighdeán -glucosylcimifugin ó Institiúid Chur Chun Cinn na Cóiré don Tionscal Leigheas Traidisiúnta (Gyeongsan, an Chóiré), agussoic-O-glúcósailhamaudól agus 4′-O-β-D-glúcósail-5-OAonraíodh -meitilvisaimínól inár saotharlann agus sainaithníodh iad trí anailísí speictreacha, go príomha trí NMR agus MS.
Tuaslagadh samplaí SDE (0.1 mg) in eatánól 70% (10 mL). Rinneadh scaradh crómatagrafach le colún XSelect HSS T3 C18 (4.6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, SAM). Bhí aicéatóinítríl (A) agus 0.1% aigéad aicéiteach in uisce (B) sa chéim shoghluaiste ag ráta sreafa 1.0 mL/nóim. Baineadh úsáid as clár grádáin ilchéime mar seo a leanas: 5% A (0 nóim), 5–20% A (0–10 nóim), 20% A (10–23 nóim), agus 20–65% A (23–40 nóim). Scanadh an tonnfhad braite ag 210–400 nm agus taifeadadh é ag 254 nm. Ba é 10.0 an toirt insteallta.μL. Ullmhaíodh tuaslagáin chaighdeánacha chun trí chrómón a chinneadh ag tiúchan deiridh de 7.781 mg/mL (bunleibhéal-O-glúcósailcimifugin), 31.125 mg/mL (4′-O-β-D-glúcósail-5-O-meitilvisaimínól), agus 31.125 mg/mL (soic-O-glúcósailhamaudól) i meatánól agus coimeádta ag 4°C.
2.3. Measúnú ar Ghníomhaíocht Frith-AthlastachIn Vitro
2.3.1. Cultúr Cealla agus Cóireáil Samplach
Fuarthas cealla RAW 264.7 ón American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, SAM) agus fásadh iad i meán DMEM ina raibh 1% antaibheathach agus 5.5% FBS. Goradh na cealla in atmaisféar taisithe de 5% CO2 ag 37°C. Chun na cealla a spreagadh, cuireadh meán DMEM úr in ionad an mheáin, agus lipopolysaccharide (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, SAM) ag 1μcuireadh g/mL leis i láthair nó as láthair SDE (200 nó 400μg/mL) ar feadh 24 uair an chloig breise.
Rinneadh na cealla a chóireáil le SDE agus spreagadh iad le LPS ar feadh 24 uair an chloig. Rinneadh anailís ar tháirgeadh NO trí nítrít a thomhas ag baint úsáide as an imoibrí Griess de réir staidéir roimhe seo [12]. Eisfhearadh na gcítocíní athlastacha PGE2, TNF-α, agus cinneadh IL-6 ag baint úsáide as trealamh ELISA (córais T&F) de réir threoracha an mhonaróra. Cinneadh éifeachtaí SDE ar tháirgeadh NO agus cytokine ag 540 nm nó 450 nm ag baint úsáide as Wallac EnVision.™léitheoir micreaphlátaí (PerkinElmer).
2.4. Measúnú ar Ghníomhaíocht Frith-osteoarthritisIn Vivo
2.4.1. Ainmhithe
Ceannaíodh francaigh fhireann Sprague-Dawley (7 seachtaine d'aois) ó Samtako Inc. (Osan, an Chóiré) agus cuireadh faoi choinníollacha rialaithe iad le timthriall solais/dorchadas 12 uair an chloig ag°C agus% taise. Tugadh aiste bia saotharlainne agus uisce do na francaighad libitumRinneadh na nósanna imeachta turgnamhacha go léir i gcomhréir le treoirlínte na nInstitiúidí Náisiúnta Sláinte (NIH) agus cheadaigh Coiste Cúraim agus Úsáide Ainmhithe ollscoil Daejeon (Daejeon, Poblacht na Cóiré) iad.
2.4.2. Ionduchtú OA le MIA i bhFrancaigh
Rinneadh na hainmhithe a randamú agus sannadh iad do ghrúpaí cóireála roimh thús an staidéir (in aghaidh an ghrúpa). Tuaslagán MIA (3 mg/50μL de shalainn 0.9%) a instealladh go díreach isteach sa spás intreach-altach den ghlúin dheas faoi ainéistéise a spreag meascán de chetamine agus xylazine. Roinneadh na francaigh go randamach ina gceithre ghrúpa: (1) an grúpa shalainn gan instealladh MIA, (2) an grúpa MIA le hinstealladh MIA, (3) an grúpa ar tugadh SDE dó (200 mg/kg) le hinstealladh MIA, agus (4) an grúpa ar tugadh indomethacin (IM-) dó (2 mg/kg) le hinstealladh MIA. Tugadh SDE agus IM do na francaigh ó bhéal seachtain roimh instealladh MIA ar feadh 4 seachtaine. Bhí an dáileog SDE agus IM a úsáideadh sa staidéar seo bunaithe ar na cinn a úsáideadh i staidéir roimhe seo [10,13,14].
2.4.3. Tomhais ar Dháileadh Meáchain Iompair na Lapa Cúil
Tar éis ionduchtú OA, cuireadh isteach ar an gcothromaíocht bhunaidh i gcumas meáchain na lapaí deiridh. Baineadh úsáid as tástálaí éagumais (Linton Instrumentation, Norfolk, an Ríocht Aontaithe) chun athruithe sa chaoimhneas meáchain a mheas. Cuireadh na francaigh go cúramach isteach sa seomra tomhais. Rinneadh meánú ar an bhfórsa meáchain a chuir an ghéag deiridh i bhfeidhm thar thréimhse 3 soicind. Ríomhadh an cóimheas dáilte meáchain leis an gcothromóid seo a leanas: [meáchan ar an ngéag deiridh dheas/(meáchan ar an ngéag deiridh dheas + meáchan ar an ngéag deiridh chlé)] × 100 [15].
2.4.4. Tomhais ar Leibhéil Cítocíne Séiream
Lártheifneoiríodh na samplaí fola ag 1,500 g ar feadh 10 nóiméad ag 4°C; ansin bailíodh an serum agus stóráladh é ag −70°C go dtí go n-úsáidfí é. Leibhéil IL-1β, IL-6, TNF-α, agus tomhaiseadh PGE2 sa serum ag baint úsáide as trealamh ELISA ó R&D Systems (Minneapolis, MN, SAM) de réir threoracha an mhonaróra.
2.4.5. Anailís Chainníochtúil RT-PCR Fíor-Ama
Baineadh RNA iomlán as fíochán comhpháirteach na glúine ag baint úsáide as an imoibrí TRI® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, SAM), rinneadh é a thras-scríobh ar ais i cDNA agus rinneadh é a aimpliú le PCR ag baint úsáide as trealamh TM One Step RT PCR le glas SYBR (Applied Biosystems, Grand Island, NY, SAM). Rinneadh PCR cainníochtúil fíor-ama ag baint úsáide as an gcóras Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR (Applied Biosystems, Grand Island, NY, SAM). Taispeántar na seichimh tosaitheoirí agus an seicheamh tóireadóir i dTábla.1Rinneadh cuid bheag de cDNAanna samplacha agus méid comhionann de cDNA GAPDH a aimpliú leis an meascán máistir TaqMan® Universal PCR ina raibh polaiméaráis DNA de réir threoracha an mhonaróra (Applied Biosystems, Foster, CA, SAM). Ba iad na coinníollacha PCR 2 nóiméad ag 50°C, 10 nóiméad ag 94°C, 15 soicind ag 95°C, agus 1 nóiméad ag 60°C ar feadh 40 timthriall. Cinneadh tiúchan an ghéin sprice ag baint úsáide as an modh Ct comparáideach (uimhir timthriallta tairsí ag an bpointe trasnaithe idir plota aimpliúcháin agus tairseach), de réir threoracha an mhonaróra.
Praghas FOB:US $0.5 - 9,999 / Píosa
Cainníocht Íosta Ordaithe:100 Píosa/Píosaí
Cumas Soláthair:10000 Píosa/Píosaí in aghaidh na Míosa
Is é osteoarthritis (OA) an neamhord mhatánchnámharlaigh is minice agus an galar comhpháirteach meathlúcháin is coitianta i measc daoine scothaosta [1Is riocht é OA a tharlaíonn go páirteach mar gheall ar ghortú, cailliúint struchtúr agus feidhm cartlaige, agus mírialú conairí pró-athlastacha agus frith-athlastacha [2,3Bíonn tionchar aige go príomha ar an cartlaig airteach agus ar an gcnámh fochondrach sna hailt shinoviacha agus bíonn teip chomhpháirteach mar thoradh air, rud a fhágann pian agus meáchan á iompar, lena n-áirítear siúl agus seasamh [4].
Níl aon leigheas ar OA, toisc go bhfuil sé an-deacair an cartilage a athchóiriú nuair a bhíonn sé scriosta [5Is iad cuspóirí na cóireála pian a mhaolú, soghluaisteacht na n-alt a chothabháil nó a fheabhsú, neart na n-alt a mhéadú, agus éifeachtaí míchumais an ghalair a íoslaghdú. Tá sé mar aidhm ag cóireálacha cógaseolaíocha ar OA pian a laghdú d’fhonn feidhm chomhpháirteach agus cáilíocht beatha an othair a mhéadú. Cé gurb é scrios cartlaige an phríomhimeacht in OA, is é díghrádú collaigine an teagmhas bunúsach a chinneann dul chun cinn dochúlaithe OA i gcomhar le hathlasadh [6,7Meastar go laghdóidh cóireálacha a bhfuil gníomhaíocht frith-athlastach agus chondrochosantach acu pian agus go gcoimeádfaidh siad sláine an mhaitrís in othair OA.
Dá bhrí sin, is dócha go mbeidh laghdú ar athlasadh tairbheach i mbainistíocht OA. Tugann staidéir le déanaí le fios go bhfuil róil chosanta ag acmhainní luibhe ar dhul chun cinn OA, i dtéarmaí athlasadh chondrocyte agus scrios breise cartlaige a mhaolú, trína gcumas idirghníomhú le fíocháin a bhaineann leis na hailt, rud a fhágann go maolaítear pian comhpháirteach [8].
Fréamh anSaposhnikovia divaricataÚsáidtear Schischkin (Umbelliferae) go forleathan sa leigheas traidisiúnta chun tinneas cinn, pian, athlasadh agus airtríteas a chóireáil sa Chóiré agus sa tSín [9,10]. Na héifeachtaí cógaseolaíochta éagsúla a bhaineann leSaposhnikovia divaricata(SD) áirítear airíonna frith-athlastacha, faoisimh pian, frithphireatach, agus frith-airtríteacha freisin [9,11Léirigh staidéar le déanaí go bhfuil éifeachtaí féideartha frith-réamatóideacha ag sliocht cróimóin SD i samhail lucha d’airtríteas spreagtha ag collaigine [10]; áfach, is beag staidéar a rinneadh chun tacú le gníomhaíocht frith-athlastach agus frith-airtríteasSaposhnikovia divaricatasliocht (SDE).
Dá bhrí sin, rinne an staidéar seo imscrúdú ar ghníomhaíochtaí frith-athlastacha agus frith-osteoarthritis sliocht eatánóil 70% de SD. Ar dtús, rinneadh meastóireacht ar éifeacht frith-athlastach SDE.in vitroi gcealla RAW 264.7 spreagtha ag LPS. Ansin, rinneadh éifeacht frith-osteoarthritis SDE a thomhas trí mheasúnú a dhéanamh ar dháileadh meáchain, ar dhíghrádú cartlaige airtríteas, agus ar fhreagairtí athlastacha i samhail francach d’OA spreagtha ag iaidéacéatáit mhonasóidiam (MIA-).